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求MTT法实验原理与MTT溶液的配制方法

2024-08-19 23:17:01 来源:网络

求MTT法实验原理与MTT溶液的配制方法

MTT法MTT 溶液的配制方法 -
MTT 法是一种常用的实验技术,其关键步骤之一是MTT溶液的配制。首先,需要准备的MTT浓度为5毫克每毫升。具体操作是,取0.5克MTT粉末,将其溶解于100毫升的磷酸缓冲液(通常选择PBS)或者无酚红的培养基中。在溶解过程中,确保容器的清洁,以保证溶液质量。完成溶解后,使用0.22微米的滤膜过滤,以去除溶后面会介绍。
通常,此法中的MTT 浓度为5mg/ml.因此,可以称取MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃ 避光保存即可.在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住.需要注意的是,MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数好了吧!.

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贴壁细胞mtt试验原理及方法步骤是什么?详细点,,, -
普通MTT法实验步骤:1:接种细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200ul.2: 培养细胞:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。3:呈色:培养3-5天后,每孔加MTT(噻唑蓝)溶液(5mg/ml用PBS配制,pH=7好了吧!.
MTT溶液的配制方法通常,此法中的MTT浓度为5mg/ml。因此,可以称取MTT0.5克,溶于100ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22m滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。需要注意的是,MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不后面会介绍。
IL-2活性测定问题 -
4.每孔加入20ulMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用PBS冲2-3遍后,再加入含MTT的培养液。5.终止培养,小心吸去孔内培养液。6.每孔加入150ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。7.同时到此结束了?。
双抗、环丙沙星;2.4℃:DMEM、1640、PBS、已配培养基;3.-20℃:MTT、MTS、DMSO、血清、胰酶;(四)缓冲间:1.CO2罐、液氮罐;(五)换衣间1.实验服、拖鞋、手套、口罩、酒精喷壶;二、实验前准备(一)实验前将需要带入的物品洗净、高温灭菌、喷酒精,放入传送窗,将传送窗与细胞间紫外开启杀菌半小时;(二)半小时后到此结束了?。
配制MTT液时,发现MTT粉末竟然不能溶于PBS溶液,但能溶于胜利盐水,求原因...
MTT常温下溶解较慢,一般要在37°c加热一下.
最大的可能是你称错了。或者浓度不对。标准配法是溶解于PBS中,深度为0.5%。并且PBS对一般的试剂溶解度没影响。你可以重新试一下。或者还是这个情况,可能是你手头的东东不是MTT或者MTT质量太差,非常的差。
可用于检测抗坏血酸的化学方法有哪些 -
另外。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡软件包;MTT 2,6—DCIP 标准溶液的消耗量;l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度。DPI对于维生素C具有良好的选择性。此法已广泛应用于石油,主要问题是操作过程中反应完全与否、简便.600 ml。一般情况下来源于水果和蔬菜中。五L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒(酶学方法) 1,电极好了吧!
1.磷酸盐/柠檬酸缓冲液———pH值大约3.5;MTT2.AAO(坑坏血酸-氧化酶)——每板约17UAAO3.PMS溶液六.磷钼蓝分光光度法测定维生素C基于在一定的反应条件下,维生素C可以定量地将磷钼酸锭还原成磷钼蓝,提出了一种新的测定维生素C的分光光度法。该方法很方便、快速地测定生物、药物等试样中的维生素C,准确度和说完了。